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公司动态
Α-葡萄糖苷酶说明书
发布时间:2012-07-25        浏览次数:747        返回列表
Α-葡萄糖苷酶详细技术参数

一  产品介绍

外 观: 白色微黄的无定形粉末

比 活 性: ≥10U/mg

稳 定 性: 20℃至少稳定一年

分 子 量: 大约65KD
cas:9001-42-7
等 电 点: 5.2

米氏常数: 6.3 x 10–4

M(PNPG)

抑 制 剂: 不受叠氮钠的抑制

pH稳定性: 5.5~9.5 (Fig.3 1)

适 pH: 7.5 (Fig.3 2)

适温度: 大于65℃ (Fig.3 3)

热稳定性: 55℃以下稳定 (Fig.3 4)

Α-葡萄糖苷酶二 、酶活测定方法 

1. 原理


p Nitropheny1 a D glucopyranoside (PNPG) + H2O a D glucose+P Nitrophenol (PNP)

PNP 在405nm处有特异吸收,通过测定在405nm处吸光度的变化速率计算该酶的活性。

2. 定义 1个酶活单位是指在以下反应条件下1分钟生成1微摩尔PNP的酶量,表示为1个单位。

3. 检测方法 检测方法 检测方法 检测方法

3.1 样品稀释液的配制 样品稀释液的配制 样品稀释液的配制 样品稀释液的配制

在 800毫升去离子水中,加入 27.2 克磷酸二氢钾,用氢氧化钾调节 pH=7.0(25℃)左右,加 0.37

克EDTA.2Na、3.00克Thesit、1.00 克叠氮钠搅拌溶解,用氢氧化钾或盐酸调节pH=7.0±0.05(25℃),

定容至1升。

3.2 酶活检测试剂的配制 酶活检测试剂的配制 酶活检测试剂的配制 酶活检测试剂的配制

在 800 毫升去离子水中,加入 13.6 克磷酸二氢钾、用氢氧化钾调节 pH=7.0(25℃)左右,加 1.50

克“4 Nitrophenyl a D gluco pyranoside”、1 克叠氮钠,搅拌溶解,调节 pH=7.0±0.05(25℃), ,, ,定容至 1

升。

3.3 待测样品的配制
检测前用卧氏称量管称量所需酶,酶称量时,应至少称量10mg的酶,以保证称量的准确性。用酶

稀释液溶解,定容到配制体积。

3.4Α-葡萄糖苷酶 酶活检测步骤

按以下要求加入试剂:检测试剂0.900ml,37℃预热60秒,加入0.018ml待检样品,迅速搅拌均匀,

1 分钟后,在 405nm 测定 180 240 秒内吸光度的变化率。此法酶的线性为 100 800U/L,建议检测时用

200 400U/L之间的标本进行检测。