幽门螺旋杆菌Warthin Starry 银染试剂盒说明书
5种试剂复合试剂盒用于幽门螺旋杆菌染色
目录编号：WS-12T（用于12-48切片的染色）
产品介绍
Warthin Starry银染试剂盒可简单迅速地对组织学部分和幽门螺旋杆菌进行染色。本试剂盒特有12份明胶液，可供孵育和染色用。加入其他试剂可配成用于浸润切片（可同时染1-4个切片）的活性显影液。Warthin Starry银染试剂盒的染色原理为，利用对苯二酚将AgNO3还原，形成的Ag粘附在幽门螺旋杆菌上。显微镜下显示幽门螺旋杆菌被染呈深棕色或黑色，细胞染成棕黄色，细胞核呈棕色。幽门螺旋杆菌一般可在上皮组织表面粘液、胃顶腺和胃粘膜上检测到。
产品描述
Warthin Starry银染试剂盒 – 用于组织学石蜡切片中，对幽门螺旋杆菌的染色
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试剂盒组成 |
规格WS-12T（12-48切片的12次染色） |
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酸溶液 |
500 ml （KOT-OT-500） |
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硝酸银晶体 |
5 g （SNP-P-5） |
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硝酸银，WS溶液 |
3 ml （SNWS-OT-3） |
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明胶溶液（孵育容器） |
12×8 ml （GEL-OT-8） |
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对苯二酚溶液 |
5 ml（HQ-OT-5） |
注意：
为了更好的实验效果，请遵守如下操作建议：
l 请使用蒸馏水或去高纯度去离子水，水中切勿含有任何铝氯离子；
l 请用洁净的玻璃器皿；
l 染色过程中请勿使切片与金属物体（剪刀、镊子等）接触；
组织切片准备：
l 固定组织样本（4 % 中性甲醛、10 %中性甲醛），水冲洗后用递增浓度（Histanol 70，Histanol 80，Histanol 95，Histanol 100）的乙醇溶液进行脱水。
l 透明化处理样本：二甲苯（BioClear），或者二甲苯替代物（BioClear New）。
l 石蜡渗透包埋（BioWax 52/54, BioWax Plus 56/58, BioWax 56/58, BioWax Blue, BioWax Micro）.
l 将蜡块切至4-6 μm厚度，并置于VitroGnost 载玻片上。
组织学染色步骤：
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1 |
二甲苯（BioClear）或者其替代物（BioClear New）进行脱蜡处理 |
3次，每次2 min |
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2 |
100 %乙醇水化（Histanol 100） |
2组，5min和3min交替 |
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3 |
95 %乙醇再水化（Histanol 95） |
2 min |
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4 |
去离子水水化 |
2 min |
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5 |
浸银液准备：硝酸银晶体加入酸溶液，搅拌溶解 |
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6 |
40 ml 浸银液倒入染色缸（建议使用Coplin染色缸） 注：浸银液请勿重复使用 |
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7 |
1-4张切片浸入浸银液中，50 ℃暗室孵育 |
40 min |
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8 |
冷却至室温 |
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9 |
重要步骤：在浸泡阶段的12min准备显影液，50℃加热10min含明胶的容器，随后滴加4滴硝酸银溶液，WS溶液。立刻搅拌混匀，加入7滴对苯二酚溶液，继续搅拌混匀 |
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10 |
切片竖直插入含有显影液的染色缸，50℃孵育。切片染成黄棕色后停止染色。 |
5-10 min |
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11 |
温水充分冲洗 |
2 min |
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12 |
70 %乙醇脱水 |
2组，每组30 s |
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13 |
95 %乙醇脱水 |
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14 |
100 %乙醇脱水 |
30 s |
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15 |
100 %乙醇脱水 |
2 min |
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16 |
二甲苯（BioClear）或者其替代物（BioClear New）透明化处理 |
2组，每组2min |
注意事项：
l 染色时间非标准化、固定化，需要根据临床和实验经验来调控。
l 染色强度根据染色时间而定，实际染色操作需根据具体实验需求确定。
l 50 ℃孵育过程可使用微波炉控温。但由于微波炉不同的输出功率，对实验结果易产生偏差，建议使用标准流程操作。
染色结果：
黑色 – 幽门螺旋杆菌
棕红色 – 背景颜色
样本准备及诊断：
l 使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
l 为避免发生错误，染色及诊断等步骤由具相关专业知识的技术人员操作。
l 根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
操作安全与环境保护：
l 本产品的操作完全按照工作安全和环境保护指南。
l 根据国家要求，使用过的溶液和过期溶液应作为特殊废物处理。
l 本产品操作中使用的化学品在一定剂量下对人体有危险，使用过的组织样本具有潜在的感染性。
l 本产品操作过程中应采取必要的安全防护措施。
l 本产品操作应依照标识进⾏，产品标签和BioGnost 试剂安全性数据上均标有注意及警告事项。
贮藏、稳定性及逾期日期：
请按试剂标签上的储存温度密封保存Warthin Starry 试剂盒，请勿冷冻，避免阳光直射。生产日期及逾期日期标于生产标签上。
相关参考文献：
1. Culling, C.F.A. (1974): Handbook of histopathological and histochemical techniques, 2nd ed., Butterworth, London, UK.
2. Sheehan D.C. et Hrapchak, B.B. (1980): Theory and Practice Histotechnology, 2nd ed., CV Mosby, St. Louis, (MO), pp 52, p 14-167.
上海亿欣生物科技有限公司供应幽门螺旋杆菌Warthin Starry 银染试剂盒 及其他特殊染色液、苏木素伊红染色液。