免疫组织化学组织细胞的包埋种类
(一)石蜡包埋法
石蜡是组织切片技术中应用较广泛的包埋剂,切片石蜡须是经多次过滤后呈半透明状的 石蜡,熔点为56—58~C的蜡较适宜。
包埋时应注意包埋面必须平整,破碎组织应聚集在一起包埋,并注意一些特殊的包埋 面。包埋蜡的温度应与组织块温度接近,过高会烫伤组织,过低使组织和石蜡分离,不利于切片。
(二)体液包埋法
体液标本,如痰液、胃液、尿液、胸腹水等,也可行石蜡包埋。痰液应选用含血液的部分或较为可疑的实体部分,滴上伊红后,用皱纹纸包好,用10%的中性甲苯固定,再经常规脱水、透明、浸蜡并包埋。新鲜的胃液、尿液、胸腹水等体液标本,倒去上层的澄清液体,将下面浑浊的液体放人离心管中,以2000~3000r/min离心15min,倒去上清液后,以10%中性甲醛固定下面的沉淀物,然后进行脱水、透明、浸蜡和包埋。
(三)快速石蜡包埋法
本法适用于没有冰冻切片设备,进行术中病理诊断的单位,取材时注意应小而且薄。主要过程如下。
(1)将组织放人混合固定液中(40%甲醛10ml,95%乙醇85ml,冰醋酸5m1)。
(2)人纯丙酮I,3rain。
(3)人纯丙酮Ⅱ,3min。
(4)人苯,2min。
(5)人石蜡,5min。
(6)快速包埋后切片、染色封固。
(四)冷冻干燥包埋法
冷冻干燥包埋法的基本原理是将新鲜组织低温速冻,再利用真空排除组织内所有水分,使石蜡直接浸入组织内而制成蜡块。其优点是可以保存组织内可溶性物质,防止蛋白质变性和酶失活。
基本过程:新鲜组织在液氮中速冻后,真空抽气,以排除组织内的水分,然后将充分干燥的组织用甲醛蒸气固定,再将固定过的组织浸入石蜡内浸蜡,石蜡包埋。此法包埋的蜡块可用于免疫荧光和免疫酶标记,也可用于放射自显影及IGSS方法。
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