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PA317小鼠成纤维细胞
细胞描述
PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择，可以选出保留了包装功能的细胞。 选择后，细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天，以稀释残留的氨甲喋呤。 Cells shipped from the ATCC have been selected in medium containing 0.03 mM hypoxanthine, 0.001 mM amethopterin (methotrexate), and 0.02 mM thymidine prior to freezing, and should be grown in HT medium for 4 days after receipt. 此后细胞不需选择可以稳定至少1个月。
动物种别
小鼠
性别
***
组织来源
胚胎
形态
成纤维细胞
培养基和添加剂
DMEM培养基(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%
气相：空气，95%；二氧化碳，5%
温度：37摄氏度
供应限制
A。仅供研究之用。